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试剂耗材:试管、无水葡萄糖、苯酚、水浴锅、紫外可见分光光度计、万分之一天平
1、配置标液:取无水葡萄糖100mg定容至100mL得到1000μg/mL的葡萄糖标液,摇匀后吸取10mL定容至100mL得到100μg/mL的葡萄糖标准液
2、苯酚溶液配制成90%苯酚液,将90%苯酚液1:14比例配制,临用新配
3、配置标曲和样品溶液:取8支试管做标曲,2支试管做样品
4、:样品配置:称取20mg样品定容至100mL,取0.5mL补1.5mL水,加苯酚1.0mL和硫酸5.0mL
按顺序逐步添加:葡萄糖标液/样品→水(补至2mL)→苯酚1mL→硫酸5mL(缓慢滴加)
| 0 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 样品 | |
| 标液/样 | 0 | 0.1 | 0.2 | 0.4 | 0.6 | 0.8 | 1.0 | 1.2 | 0.5 |
| 水 | 2.0 | 1.9 | 1.8 | 1.6 | 1.4 | 1.2 | 1.0 | 0.8 | 1.5 |
| 苯酚 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 |
| 浓硫酸 | 5.0 | 5.0 | 5.0 | 5.0 | 5.0 | 5.0 | 5.0 | 5.0 | 5.0 |

水浴锅升至100度,沸水浴加热20分钟。取出试管用冷水冷却10分钟(也可以冷却至室温即可)
5、上机:一共10支试管在紫外可见分光光度计-光度测定中,在490nm,用0(空白)调零,按梯度测定标液,测的吸光度。


